728x90 단백질 분석3 [단백질] 단백질 연구 시 고려해야 할 사항 2편_환원제 (Reducing agents) 지난 번에 말씀 드린 것처럼 단백질을 분석할 때에는 일반적으로 세포 내 환경에서 벗어난 환경에서 단백질을 분석하게 됩니다. 특히, 세포가 파쇄되면 국소적으로 존재하던 항산화제가 희석되는 동시에 산소와의 반응 기회가 증가하게 됩니다. 인위적으로 산화성 스트레스에 노출되는 것입니다. 많은 단백질이 산화되면 가역적 또는 비가역적으로 기능을 소실하게 되기 때문에 환원제를 첨가하여 산화를 방지할 필요가 있습니다. 주로, 2-mercaptoethanol(BME) 과 Dithiothreitol(DTT), Cleland’s reagent를 사용합니다. 역할 이러한 환원제는 유리된 sulfhydryl group을 안정화시킵니다. Protein 내 cysteine 잔기들로 인한 protein의 intemolecular 또.. 2023. 5. 25. [단백질] 단백질 연구 시 고려해야 할 사항 1편_완충용액 (Buffers) 단백질은 세포의 구성 요소일 뿐 아니라 거의 모든 세포기능을 실행하는 물질입니다. 단백질이 여러 다양한 기능을 수행하는 것은 단백질이 수없이 다른 3차원 모양을 형성하기 때문입니다. 때문에, 각 기능은 단백질의 구조에 의해 좌우됩니다. 단백질에 대한 첫 단계는 대부분 세포 내에 존재하고 있는 단백질을 조절 가능할 수 있도록 파쇄하는 것이고, 이는, 단백질이 세포 내에 존재하고 있던 환경과는 전혀 다른 환경에 노출되기 때문에 이에 대한 조절은 반드시 필요합니다. 1. 완충용액이란? 완충용액은 약산과 그 짝염기의 혼합물로, 소량의 산(H+), 염기(OH-)가 첨가되었을 때 그 용액의 급격한 pH 변동을 억제하는 용액입니다. 이러한 원리로 완충용액은 세포와 조직에 pH 변동에 저항함으로써 세포와 조직에 완충작.. 2023. 5. 23. [분석] SDS-PAGE를 이용한 목적 단백질의 크기 분석_1편 생화학 실험을 하면 반드시 경험하게 되는 SDS-PAGE 단백질의 크기를 분류하는 방법 SDS-PAGE는 무엇이고, 어떻게 사용할까요? 왜? 목적 첫째, 단백질의 크기분석 SDS-PAGE를 이용하면 시료 안에 있는 단백질의 분자량을 확인하고 싶을 때 사용합니다. 둘째, 정성적인 purity 확인 정성적인 방법 중 하나인 육안 혹은 소프트웨어로 SDS-PAGE의 band의 개수 혹은 intensity 등으로 정성적인 purity를 확인하고 싶을 때 사용합니다. 어떻게? 1. SDS의 성질 SDS의 성질을 알아봅시다. SDS(Sodium Dodecyl Sulfate)는 대표적인 음이온성 계면활성제(detergent)로서, 단백질과 강한 결합력을 가지고 있습니다. SDS와 강한 결합을 하는 단백질, 대부분의 .. 2023. 5. 3. 이전 1 다음 728x90 반응형
