728x90 전체 글25 [qPCR] Quantitative Real-time PCR_형광 표식 probe 비교 Quantative real-time PCR이란? : 각 유전자의 정확한 정량을 위해 실시간으로 형광을 측정하여 분석하는 PCR 기법 형광표식 probe는 크게 3가지로 나눌 수 있는데, 일반적으로 SYBR Green을 가장 많이 사용합니다. 1. DNA binding agents: SYBR GreenⅠ 2. Hydrolysis probe: TaqMan probe & Beacons & Scorpions 3. Hybridization probe: Light Cycler 그중에서도 가장 많이 사용하는 SYBR Green Ⅰ과 TaqMan을 비교하는 그림을 보며 이해해 봅니다. 1. DNA binding agents: SYBR GreenⅠ- Double strand DNA(dsDNA)에 결합하여 형광을 나타내.. 2023. 6. 20. [RNA] siRNA와 miRNA 비교 1. 유전자 침묵, Gene Silencing - 두 RNA를 이해하기 전에 우리는 유전자 침묵이라는 것에 대해 알아야 합니다. 유전자 침묵은 "RNA 분자를 표적으로 하여 유전자 발현억제가 생기는 경우"를 의미합니다. 즉, 유전자의 염기배열을 변화시키지 않고, 그의 발현을 인위적으로 억제하는 것, 유전자 전사단계에서의 억제와 전사 후 억제 등을 포함합니다. - RNA 간섭 (RNAi) 현상은 표적 유전자의 침묵을 통해 타겟 유전자의 발현을 억제하는 방법입니다. 2. siRNA와 miRNA는 무엇일까? 각 특징을 표로 정리하자면 다음과 같습니다. siRNA miRNA 공통점 1. 타겟 유전자 발현을 제어하는 역할을 작은 RNA(small RNA) 2. 둘은 모두 RISCs(RNA-induced silen.. 2023. 6. 14. [단백질] 단백질 연구 시 고려해야 할 사항 4편_단백질 환경 (Protein enviroment) 일반적으로 단백질의 생물학적 활성의 유지는 분자 형태의 유지에 달려있기 때문에 특히 온도 변화, 산화, 빛에 대한 노출과 같은 환경적 요인에 매우 민감합니다. 1. 온도 - 단백질은 그 특성과 실험 목적에 따라 4℃, -20℃, -80℃ 또는 액체 질소(-200℃)에 보관합니다. ; 종종 단백 용액이 얼면 변성이 초래되는데 이는 완충액이 침전되거나 부분적으로 농축되어 pH의 변화가 생겨 발생한 결과로 여겨집니다. - 일반적으로 온도가 10 ℃가 상승하면 효소 반응 속도는 거의 2배 빨라집니다. 2. 보관 - 주로 50 % Glycerol을 사용하면 단백질의 안정성을 유지할 수 있으며 냉동 보관을 해도 얼지 않습니다. ; 특히, 효소(enzyme)은 모든 단백질과 유사하게 변성에 민감하고, 높은 온도에 노.. 2023. 6. 13. [단백질] 단백질 연구 시 고려해야 할 사항 3편_세정제 (Detergent) 세포막 단백질을 분리하기 위해 단백질을 용해할 수 있는 detergent (세정제)를 사용합니다. 세포를 lysis(용해)시킬 때 사용하죠. 각 detergent는 hydrophilic head에 따라 다음과 같이 나눌 수 있습니다. Detergent Effect Ionic (이온성) Membrane을 쉽게 분산시키지만 모든 protein을 파괴하는 성질 (예: Sodium dodecyl sulfate(SDS), Lithium dodecyl sulfate(LDS)) Non-Ionic (비이온성) - 0.1% 이하의 일정 농도에서 protein 변성을 초재하지 않으므로 기능을 유지한 단백질 분리에 사용하지만 단백질 응고가 일어날 수 있음. 영향을 미치지 않으며, lipid membrane만을 파괴함. (예.. 2023. 5. 31. 이전 1 2 3 4 5 6 7 다음 728x90 반응형
