728x90 Experiment11 [Cell] Cell counting 하는 법 Cell을 Counting 하는 방법에 대해 알아보겠습니다. Cell counting이란 말 그대로, 세포의 수를 세는 과정입니다. 실험 시, 실험에 사용하는 cell의 수를 동일하게 함으로써 실험을 통제하기 위한 방법으로 사용합니다. 이 중, 현미경으로 직접 개수를 세는 방법에 대해 알아보겠습니다. 1. Hemocytometer 준비 70 % EtOH을 이용하여 Hemocytometer를 깨끗하게 씻습니다. Hemocytometer kit에 제공되는 Coverslip을 촉촉하게 적신 후, Hemocytometer 위에 조심히 올립니다. 이때, coverslip이 잘 깨지기 때문에 주의하여 조심합니다. 2. Cell 준비 Cell을 resuspension한 후, 10 μL를 1.5 mL tube에 옮겨 .. 2024. 4. 15. [ELISA] Biotin을 이용한 signal 증폭 (Biotin Signal Amplification) Biotin은 작은 vitamin 분자입니다. ; Biotin Molecular weight은 244.31g/mol Biotin은 쉽게 modify가 가능해서 protein, antibody, biomolecular probe에 화학적으로 결합할 수 있습니다. Avidin과 Streptavidin은 protein으로 서로 다른 source에서 왔지만 두 단백질 모두 biotin과 매우 강하고 specific affinity를 가진다는 공통점이 있습니다. *추가로 Neutravidin은 thermo scientific 회사에서 avidin을 modify 하여 사용하는 protein입니다. ELISA에서의 사용 - Indirect detection의 가장 일반적인 방식은 avidin과 biotin을 이용해 .. 2023. 7. 31. [HIC] HPLC_소수성 상호 작용 크로마토그래피(Hydrophobic Interaction Chromatography, HIC) 특징과 선택 방법 소수성 상호 작용 크로마토그래피란? (Hydrophobic Interaction Chromatography, HIC) : 소수성 상호작용 크로마토그래피는 단백질의 소수성 차이에 따라 단백질을 분리하는 크로마토 그래피 기법입니다. : 비극성 정지상과의 소수성 상호반응의 상대 강도에 기초하여 분자를 분리하는 방법입니다. 단백질의 분리는 단백질과 크로마토그래피 레진의 소수성 표면 간의 가역적인 상호작용에 기초합니다. 이 상호작용은 높은 이온 강도를 가진 버퍼에 의해 향상되며, 그로 인해 소수성 상호 작용 크로마토그래피는 황산암모늄으로 침전되었거나 이온 교환 크로마토그래피로 고염에 용출된 단백질 정제를 위한 이상적인 '다음단계'가 됩니다. 즉, 위의 그림으로 설명할 수 있습니다. 높은 염인 조건에서는 단백질이 .. 2023. 7. 13. [qPCR] Quantitative Real-time PCR_형광 표식 probe 비교 Quantative real-time PCR이란? : 각 유전자의 정확한 정량을 위해 실시간으로 형광을 측정하여 분석하는 PCR 기법 형광표식 probe는 크게 3가지로 나눌 수 있는데, 일반적으로 SYBR Green을 가장 많이 사용합니다. 1. DNA binding agents: SYBR GreenⅠ 2. Hydrolysis probe: TaqMan probe & Beacons & Scorpions 3. Hybridization probe: Light Cycler 그중에서도 가장 많이 사용하는 SYBR Green Ⅰ과 TaqMan을 비교하는 그림을 보며 이해해 봅니다. 1. DNA binding agents: SYBR GreenⅠ- Double strand DNA(dsDNA)에 결합하여 형광을 나타내.. 2023. 6. 20. 이전 1 2 3 다음 728x90 반응형
